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應(yīng)用行業(yè)-凱氏定氮儀是檢測種子、乳制品、飲料、飼料、土壤及其他農(nóng)副產(chǎn)品中氮含量的儀器。定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計(jì)算蛋白質(zhì)含量的儀器。因其蛋白質(zhì)含量測量計(jì)算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀,又名蛋白質(zhì)測定儀、粗蛋白測定儀。該儀器也是食品廠,藥品檢驗(yàn),肥料測定中廣泛應(yīng)用。
凱氏定氮儀的應(yīng)用
一、揮發(fā)性鹽基總氮的測定
揮發(fā)性鹽基總氮是肉食品新鮮度的一個(gè)主要指標(biāo),動物性食品(如:肉、魚類)由于酶和細(xì)菌的作用,在腐過程中,使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)(*安和二甲安),可引起食物中毒。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性,在弱堿(氧化鎂)性下能與水蒸氣一起蒸餾,真空馬弗爐將氮轉(zhuǎn)化成氨,用硼酸吸收,標(biāo)準(zhǔn)酸HCL 滴定。計(jì)算出揮發(fā)性鹽基總氮量。我國食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定,當(dāng)魚類揮發(fā)性鹽基氮的含量達(dá)到30mg/100g 時(shí),即認(rèn)為是變質(zhì)。
另外,在飼料工業(yè)的發(fā)酵過程,由于蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生一些易揮發(fā)的含氮物質(zhì),這時(shí)揮發(fā)性鹽基氮含量會升高。例如:豆粕的揮發(fā)性鹽基總氮在發(fā)酵前含量在 30-50mg/100g,發(fā)酵后就會升高。由于魚粉等動物蛋白,特別是劣質(zhì)魚粉的揮發(fā)性鹽基氮比較高,因此發(fā)酵豆粕類產(chǎn)品如果揮發(fā)性鹽基氮含量很高,可能是摻入劣質(zhì)魚粉等動物蛋白或發(fā)酵過程中出現(xiàn)腐所致。檢測時(shí)用氧化鎂替代氫氧化鈉即可,其它步驟和凱氏法*相同。
二、食品、飲料中亞硫酸鹽的測定
二氧化硫在食品工業(yè)特別是果汁、啤酒、紅酒、果脯、香腸、漢堡和蔬菜中被用作防腐劑,由于對健康的嚴(yán)重危害EC條例規(guī)定如果濃度>10mg/kg或10mL/L必須進(jìn)行標(biāo)注。檢測時(shí)總的二氧化硫通過酸性(60%磷酸)蒸氣蒸餾而被釋放,進(jìn)口馬弗爐然后由過氧化氫溶液接收和氧化形成硫酸,用標(biāo)準(zhǔn)NaOH滴定(檢出限5mL/L)。樣品前處理需經(jīng)過搖動或超聲震蕩除去二氧化碳。
三、酒中酒精含量的測定
白酒、紅酒中的酒精,可以直接通過蒸氣蒸餾2min,得到餾出液被收集后調(diào)整到固定體積,酒精的濃度用光密度計(jì)測量。通常濃度在10%的標(biāo)準(zhǔn)液回收率>99.4%。
定氮儀的應(yīng)用.png
四、揮發(fā)性酸含量的測定
揮發(fā)性酸是厭氧消化過程的中間產(chǎn)物,將樣品用磷酸酸化后,從中蒸發(fā)出揮發(fā)性酸,再用酚酞為指示劑,用NaOH滴定流出液。
五、食品中游離甲醛含量的測定
吊白塊學(xué)名甲醛次硫酸氫鈉,易溶水,半透明白色物,高溫下具有很強(qiáng)的還原性,遇酸堿分解,有漂白作用可用作增白劑,常被非法添加到食品加工中,如腐竹、豆制品等。該物60℃以上分解有害物質(zhì),120℃分解為甲醛、二氧化硫、硫化氫毒氣,使人過敏、刺激腸道,10g 能使人致死。
原理:樣品經(jīng)酸(磷酸)化后,次硫酸氫鈉甲醛中的甲醛被釋放出來,經(jīng)水蒸氣蒸餾,收集后的吸收液中的甲醛與乙酰丙酮及胺離子反應(yīng)生成黃色物質(zhì)(3,5-二乙?;?1,4-二氫盧剔啶),在435nm有吸收,用分光光度計(jì)測定甲醛含量。檢測時(shí)選用較大的(750mL)蒸餾瓶蒸餾樣品,防治樣品的漂浮物被蒸氣帶出,同時(shí)控制好蒸汽量不要太大。
六、肥料中氨態(tài)氮含量的測定
氨態(tài)氮是指樣品中的NH3中的N元素。有機(jī)肥和無機(jī)肥中的氨態(tài)氮,在堿性水蒸氣中分解為氨,硼酸吸收后用鹽酸滴定就可計(jì)算出氮的含量。實(shí)際上就是不需消化樣品的凱氏法。若在蒸餾時(shí)適當(dāng)加些不含MgO的碳酸鹽效果更好。測定步驟和凱氏法一樣。
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